2020-09-29 09:54:56admin 4102

陽離子交換柱層析原理是利用樹脂的電荷基團與水中的離子發(fā)生反應(yīng)，從而分離水中的混合物這就是層析。

什么是離子交換柱層析

離子交換柱層析使用離子交換樹脂（一種具有離子交換特性的物質(zhì)）作為固定相，用于與流動相中的特定離子進行可逆交換，從而分離混合物的層析方法

例如，陽離子交換樹脂對離子的結(jié)合力按以下順序。 Li +蛋白質(zhì)和其他生物聚合物通常是兩性的，它們與陽離子交換樹脂的結(jié)合主要與它們的性質(zhì)和pH有關(guān)。以用陽離子交換樹脂分離蛋白質(zhì)為例，在某些pH條件下，等電點pI pH的蛋白質(zhì)帶正電，并且可以與陽離子交換樹脂結(jié)合。通常pI越高，蛋白質(zhì)與離子交換樹脂的結(jié)合越強。

陽離子交換柱層析原理

層析法的最基本特征是它具有固定相和流動相。當(dāng)由于混合物成分的物理和化學(xué)性質(zhì)（吸附，溶解度，分子形狀和大小，分子等）使兩相相互移動時，由于電荷和親和力等的不同，使兩相間進行反復(fù)多次的分配而得到分離。

離子交換柱層析是基于各種離子或離子化合物的分離和純化，以及離子交換樹脂的結(jié)合強度。離子交換柱層析的固定相是一種離子交換樹脂，由一種不溶于水的惰性聚合物基質(zhì)形成，該基質(zhì)通過特定的化學(xué)反應(yīng)共價連接至特定的電荷基團。離子交換樹脂可分為三部分：聚合物基質(zhì)，電荷基團和抗衡離子。

電荷基團與聚合物共鍵形成離子可交換的電荷基團。抗衡離子是與帶電基團結(jié)合的抗衡離子，可與溶液中的其他離子基團發(fā)生可逆交換反應(yīng)。抗衡離子帶正電的離子交換樹脂可以交換成帶正電的離子基團，稱為陽離子交換樹脂。帶負電荷離子交換樹脂的抗衡離子交換帶負電荷的離子基團，被稱為陰離子交換樹脂。

陽離子交換柱的使用方法

1.交換

將測試溶液添加到交換柱中，并使用活塞控制交換的特定流速。片刻之后上層樹脂全部被交換、下層未被交換，中間則部分被交換，這一段稱為“交界層”。

2.裝柱

離子交換通常在離子交換柱中進行。離子交換柱通常由玻璃制成，并且在安裝交換柱時，將一層玻璃絲鋪設(shè)在交換柱的下端，倒入少量水，并倒入含有水的樹脂。樹脂下沉以形成交換層。安裝離子交換柱時，請確保在樹脂層中沒有氣泡殘留，以便在更換過程中測試溶液不與樹脂接觸。樹脂的高度通常為柱高度的約90％。還應(yīng)在離子交換柱的頂部放置一層玻璃纖維，以防止添加測試溶液時樹脂被洗掉。安裝更換離子交換柱后，請用蒸餾水清洗并關(guān)閉活塞以供使用。由于不能讓樹脂暴露于空氣中，溶液的添加會在樹脂間隙中形成氣穴，導(dǎo)致交換不徹底。

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